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密度梯度分離 > 即用型分離液

人  單個核細胞  中性粒細胞  外周血  

Polymorphprep

品牌:Serumwerk Bernburg AG點擊下載說明書

儲存:+4 °C to +30 °C,無菌,避光

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詳細說明


Polymorphprep

人多形核細胞分離液/Isolation of human polymorphonuclear cells

Polymorphprep是一種即用型、無菌、內毒素含量很低的分離人外周血中多形核白細胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes)的分離液。

人血液中,除嗜堿性粒細胞外,多形核白細胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes) 的浮力密度比單個核細胞大得多,>1.085 g/ml。不幸的是,紅細胞的浮力密度往往為 1.09 – 1.11 g/ml,這使得使用類似于用于單個核細胞的密度屏障從全血中分離更加困難。

為了克服這些困難,已經開發了許多方案。

Polymorphprep 的高滲透壓導致紅細胞失水并收縮,從而增加其有效浮力密度。這允許葡聚糖聚集的紅細胞通過致密介質迅速沉淀。

因為分離介質和紅細胞之間的滲透梯度隨著細胞進一步沉降到分離介質中而下降(即紅細胞的水分損失在 Polymorphprep 的頂部最大,隨著它們進一步沉降而逐漸降低)——泛影酸鹽梯度在內部形成密度屏障。 PMNs 帶處于此密度梯度內,而單個核細胞則保持在樣品/介質界面處。

使用特定的 LAL 測試檢查每批 Polymorphprep 的內毒素水平。我們的目標是生產內毒素水平低于或等于 0.13 IU/ml 的批次。

該方法僅對未稀釋的全人血有效,對富含白細胞的部分或來自動物物種的血液無效。

溫度對于獲得最佳結果很重要,因為溫度的變化會影響 Polymorphprep 溶液的密度和粘度。 血樣和分離介質的溫度應保持在 18 – 22 °C 之間。使用 Coulter STKR 細胞分析儀對 Polymorphprep 分離的頂部和底部條帶進行分析,如右圖所示。 分析儀將樣品中的細胞數量(縱坐標)確定為細胞體積(橫坐標)的函數。 相對細胞數是特定體積的細胞數,表示為每個樣品中細胞總數的一部分。

Polymorphprep 頂部的細胞帶僅包含外周血單個核細胞 (PBMC)。 細胞帶本身可分為淋巴細胞(上層,1)和單核細胞(下層,2)。

所有的 PMN 都位于底部細胞帶中,該帶包含在 Polymorphprep 溶液中。 紅細胞對 PMN 條帶的污染占總細胞數的 2 – 6 %。

相關技術參數:

泛影酸鈉/Sodium diatrizoate13.8   % (w/v)
聚蔗糖/Polysucrose8.0   % (w/v)
密度/Density1.113   ± 0.001 g/ml
滲透壓/Osmolality445   ± 15 mOsm
內毒素/Endotoxins<   1.0 IU/ml

分離效果圖:

*10/25/2021 告知有關 Polymorphprep 中滲透壓規格的更改。 Polymorphprep 中滲透壓的新規格現在為 440-500 mOsmol/kg(之前為 445+/-15 mOsmol/kg)。 2021 年以后的所有生產批次都將受到這一變化的影響。新規范不會對分離產生任何影響。增加滲透壓的主要優點是理論上更有效地將紅細胞與其他血液成分分離。我們可以確保所有其他參數都不會受到這種適應的影響。

廠家產品網頁鏈接:https://diagnostic.serumwerk.com/products/polymorphprep/